Etude des mécanismes moléculaires impliqués dans la différenciation des progéniteurs rétiniens
Contact
- Directeur d’équipe : Olivier Goureau, DR2 Inserm
- E-mail : olivier.goureau@inserm.fr
- Téléphone : 01 53 46 25 32
- Membres de l’équipe
Présentation
La thérapie cellulaire via l’implantation de cellules souches (ou progénitrices) pourrait être envisagée pour le traitement des maladies dégénératives de la rétine.
L’approche la plus adaptée consisterait à guider la différenciation de ces cellules en photorécepteurs, les neurones principalement lésés. Pour cela, la compréhension des mécanismes moléculaires (facteurs intrinsèques et extrinsèques) gouvernant le devenir de ces cellules est indispensable. Ceci est réalisé dans notre groupe par l’identification du programme transcriptionnel des progéniteurs au cours du développement normal de la rétine et dans des conditions où la différenciation des photorécepteurs est affectée.
A partir de banques soustractives, deux facteurs de transcription, Foxn4 et Ptf1a, ont été isolés et impliqués dans le développement de la couche nucléaire interne de la rétine. Dans des conditions où la différenciation des photorécepteurs est bloquée par l’addition de CNTF, 30 gènes dont l’expression est régulée par cette cytokine ont été sélectionnés. Parmi, ces gènes, la pleiotrophine a pu être impliquée dans l’inhibition de la différenciation des photorécepteurs. Des études fonctionnelles par sur- et sous-expression sont poursuivies ex vivo (explants rétiniens) et in vivo (embryon de poulet, souris nouveau-nés) sur cinq gènes régulés négativement par le CNTF, deux facteurs de transcription (Bclaf, Baz2b) et trois gènes impliqués dans la signalisation cellulaire (Spak, Usp32 et PTIP51).
Une identification complète du programme transcriptionnel contrôlant la différenciation des photorécepteurs a débuté parallèlement, par une analyse par “ Clustering ” sur puces à ADN des différents gènes régulés par le CNTF. Un second crible rapide (co-électroporation ex vivo avec un gène rapporteur exprimant la luciférase sous le promoteur de la rhodopsine et des vecteurs capables de sur ou sous exprimer les gènes candidats) sera développé pour isoler les gènes capables de promouvoir la différenciation des photorécepteurs.
D’un point de vue fondamental, nos travaux permettront de comprendre le rôle des gènes sélectionnés dans la différenciation des photorécepteurs. Dans une optique de thérapie cellulaire, nous envisageons de tester la capacité des gènes candidats à diriger les cellules souches rétiniennes dans le lignage des photorécepteurs et sur d’autres types de cellules souches utilisées dans l’Institut de la Vision (cellules souches neurales, mésenchymateuses, voir cellules ES et de sang de cordon).
Axes de recherche
- Analyse de la différenciation des photorécepteurs :
Identification des mécanismes moléculaires mis en jeu,
Caractérisation du programme transcriptionnel du lignage photorécepteur
- Validation fonctionnelle de gènes candidats (expression ectopique dans la rétine de vertébrés par approche rétrovirale et électroporation d’ADN plasmique nu) : Rôle des facteurs de transcription Ptf1a, Foxn4, Bclaf et Baz2b
- Visée restauratrice de la perte visuelle à partir des cellules souches : Analyse du potentiel thérapeutique des cellules souches adultes rétiniennes
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Membres de l’équipe
- Xavier Guilloneau (CR1, Inserm)
- Gaël Orieux (MCU, Paris 6)
- Elise Lelièvre (Etudiant, Paris 6)
- Laura Picault (Etudiant, Paris 6)
- Amélie Slembrouck (IE - EU)
- Sylvie Thomasseau (TN- Inserm)
Dernières publications
Roger J, Goureau O, Sahel J-A and Guillonneau X. Mol. Vis. 2007 ; 13:206-219.
Roger J, Brajeul V, Thomasseau S, Hienola A, Sahel JA, Guillonneau X, and Goureau O. Dev Biol. 2006, 298:527-539.
Goureau O, Rhee DK and Yang XJ. Dev. Neurosci. 2004, 26:359-370.
Rhee DK, Goureau O, Chen S and Yang XJ. J. Neurosci. 2004, 24:9779-9788.
